頂空氣(qi)相色譜系(xi)列(lie)講(jiang)座(15)
人體血液(ye)中一氧化(hua)碳(tan)的分(fen)析(xi)(xi)——定性分(fen)析(xi)(xi)2
一、檢材采取和保存
CO中毒惟(wei)一重要檢(jian)材(cai)是血(xue)(xue)液(ye)-心(xin)(xin)血(xue)(xue),非心(xin)(xin)包(bao)(bao)液(ye)、胸腔雜血(xue)(xue)。為(wei)防(fang)止血(xue)(xue)樣(yang)凝成(cheng)塊,可在血(xue)(xue)樣(yang)中加少許EDTA固體,因凝成(cheng)塊狀的(de)血(xue)(xue)定量偏低。當死亡(wang)時(shi)間(jian)長而取(qu)不出(chu)心(xin)(xin)血(xue)(xue)時(shi),取(qu)帶心(xin)(xin)包(bao)(bao)液(ye)的(de)心(xin)(xin)血(xue)(xue)或胸腔血(xue)(xue)代替,送(song)檢(jian)時(shi)一定要對(dui)所送(song)檢(jian)材(cai)加以(yi)充(chong)分說明(ming),使(shi)用時(shi)先離心(xin)(xin)只(zhi)取(qu)用紅血(xue)(xue)球多的(de)部(bu)分,其它血(xue)(xue)清和雜質棄(qi)去(qu)。
CO中毒血可保存較長時間,不易腐(fu)敗(bai),曾有(you)報導從埋后100 多(duo)天的尸體血液中檢出CO。含CO的血樣(yang)不密封(feng)或露置(zhi)空氣(qi)中,其血中HbCO 易被(bei)空氣(qi)中氧所置(zhi)換又轉化(hua)為(wei)HbO2,使分析結果偏(pian)低,
一般采心血(xue)量10~20mL即可,裝滿(man)容(rong)器密(mi)封低溫(wen)保存。如(ru)需(xu)長(chang)期(qi)保存,為防止HbCO的(de)損失,可于血(xue)液(ye)表(biao)面加0.5~1cm厚的(de)液(ye)體(ti)石蠟,再密(mi)封置低溫(wen)冰箱中保存。
二(er)、一氧(yang)化(hua)碳定性分析
⒈ 化學檢(jian)測(ce)法
⑴ 氫氧(yang)化(hua)鈉法——取含(han)CO的血(xue)與(yu)空白血(xue)各少許(xu)均用20倍水稀(xi)釋(shi),加入(ru)等體(ti)積的30%NaOH水溶液混(hun)合,對正常空白血(xue)即出(chu)現綠褐(he)色(se)絮(xu)狀物沉淀,對含(han)CO的血(xue)則出(chu)現紅(hong)色(se)絮(xu)狀物浮于(yu)液面,紅(hong)色(se)絮(xu)狀物能(neng)逐步氧(yang)化(hua)為綠褐(he)色(se)絮(xu)狀物,變色(se)速度取決于(yu)CO在血(xue)中(zhong)的量(liang)。
⑵ 鞣(rou)酸試(shi)驗——取含CO的血(xue)與空(kong)白(bai)血(xue)各少(shao)許均用4倍水稀釋(shi),加入等體(ti)積的3%鞣(rou)酸溶(rong)液混勻放置(zhi),空(kong)白(bai)血(xue)呈(cheng)灰(hui)色,含CO的血(xue)則呈(cheng)桃紅(hong)色,顏色保留時間(jian)較長,能辨認CO飽和度超過20%的血(xue)。
⑶ 快速加熱法——取含CO的(de)血(xue)(xue)與空(kong)白(bai)血(xue)(xue)各1mL,在(zai)沸水俗中邊煮邊對比觀察顏色變(bian)化,正常血(xue)(xue)為褐黑色,含CO的(de)血(xue)(xue)呈桃紅色(飽和度需達30%~40%才有此顏色)
⒉ 鈀(ba)鏡反應
基于氯化(hua)鈀(ba)(ba)被CO還原為金屬鈀(ba)(ba),浮在(zai)溶液表(biao)面形成金屬光(guang)澤的(de)鈀(ba)(ba)膜稱為鈀(ba)(ba)鏡。還可根據還原生成“鈀(ba)(ba)鏡"的(de)程(cheng)度來分析血中CO的(de)量。
擴(kuo)(kuo)(kuo)散盒(he)法——在(zai)擴(kuo)(kuo)(kuo)散盒(he)內圈加(jia)0.5%氯化(hua)鈀(ba)(ba)溶液0.5mL,外(wai)圈中加(jia)2mL檢材(cai)血,立即蓋上(shang)(shang)經蒸餾水濕潤過的(de)(de)蓋子,再從蓋子邊上(shang)(shang)的(de)(de)小(xiao)口(kou)處滴(di)(di)加(jia)10滴(di)(di)40%的(de)(de)硫酸(suan)(suan),速將(jiang)蓋子擰緊密封(feng),輕輕轉動擴(kuo)(kuo)(kuo)散盒(he),使(shi)硫酸(suan)(suan)與檢材(cai)血充分接觸,如室溫<5℃需水浴上(shang)(shang)稍加(jia)熱,5分鐘后注意觀(guan)察擴(kuo)(kuo)(kuo)散盒(he)內圈有(you)明(ming)顯(xian)鈀(ba)(ba)鏡產生。
PdCl2+CO+H2O → Pd↓+CO2+HCl
為防(fang)止硫化氫的(de)干擾,在含CO的(de)血中加稀酸(suan)促使碳氧血紅蛋(dan)白解離同時,可(ke)加入(ru)醋酸(suan)/醋酸(suan)鉛除去(qu)干擾。此方法靈敏(min)度高,但屬性差點。